本技術(shù)涉及微生物農(nóng)藥的，尤其是涉及一種防治農(nóng)作物害蟲(chóng)的微生物農(nóng)藥及其制備方法。

背景技術(shù)：

1、微生物農(nóng)藥是指以微生物活體為有效成分，防治病、蟲(chóng)、草、鼠等有害生物的生物源農(nóng)藥，選擇性強(qiáng)，對(duì)人、畜、農(nóng)作物和自然環(huán)境安全，不傷害天敵，不易產(chǎn)生抗性，能克服化學(xué)農(nóng)藥對(duì)生態(tài)環(huán)境的污染和減少農(nóng)副產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留量，提升農(nóng)副產(chǎn)品品質(zhì)，有力地促進(jìn)農(nóng)村經(jīng)濟(jì)增長(zhǎng)和農(nóng)民增收。其中，蘇云金芽孢桿菌是一種防治效果極佳的微生物源低毒殺蟲(chóng)劑，以胃毒作用為主，在害蟲(chóng)低齡期使用效果較好，主要對(duì)部分鱗翅目害蟲(chóng)幼蟲(chóng)有較好的防治效果，可用來(lái)防治菜青蟲(chóng)、稻苞蟲(chóng)，尺蠖、松毛蟲(chóng)、煙青蟲(chóng)、玉米螟、棉鈴蟲(chóng)、稻縱卷葉螟、蓑蛾、地老虎等。其殺蟲(chóng)原理是，蘇云金桿菌經(jīng)害蟲(chóng)食入后，寄生于寄主的中腸內(nèi)，在腸內(nèi)合適的堿性環(huán)境中生長(zhǎng)繁殖，晶體毒素經(jīng)過(guò)蟲(chóng)體腸道內(nèi)蛋白酶水解，形成有毒效的較小亞單位，它們作用于蟲(chóng)體的中腸上皮細(xì)胞，引起腸道麻痹、穿孔、蟲(chóng)體癱瘓、停止進(jìn)食。隨后蘇云金桿菌進(jìn)入血腔繁殖，引起敗血癥，導(dǎo)致蟲(chóng)體死亡。蘇云金芽孢桿菌主要來(lái)源于土壤，廣泛分布于世界各地的土壤、昆蟲(chóng)尸體、植物體表面、貯藏物或倉(cāng)庫(kù)灰塵、污水等環(huán)境中。

2、正是由于微生物農(nóng)藥中的主要?dú)⑾x(chóng)成分均是來(lái)自自然環(huán)境，因此使用此類農(nóng)藥不僅能夠起到良好的殺蟲(chóng)效果，還不會(huì)對(duì)自然環(huán)境產(chǎn)生負(fù)面影響，然而正是由于這一點(diǎn)，微生物農(nóng)藥(尤其以蘇云金芽孢桿菌類農(nóng)藥為例)具有穩(wěn)定性較差的缺陷，在田間應(yīng)用過(guò)程中，易受環(huán)境因素影響，防效不穩(wěn)定，受光受熱后會(huì)出現(xiàn)殺蟲(chóng)功效大幅減退的現(xiàn)象。因此有研究人員認(rèn)為應(yīng)當(dāng)將其與金屬骨架復(fù)合，以此提升微生物農(nóng)藥的防治長(zhǎng)效性，然而這又會(huì)導(dǎo)致農(nóng)藥藥效不足，無(wú)法滿足使用者的殺蟲(chóng)需求。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本技術(shù)提供一種防治農(nóng)作物害蟲(chóng)的微生物農(nóng)藥及其制備方法。

2、第一方面，本技術(shù)提供了一種防治農(nóng)作物害蟲(chóng)的微生物農(nóng)藥的制備方法，包括以下步驟：s1、提取多糖：取bt?4d19桿菌菌株，培養(yǎng)，收集菌液，收集上清液，醇沉，得到粗提多糖，消化殘留蛋白，脫鹽，離子交換層析，凝膠過(guò)濾層析，得到bt?4d19多糖；s2、提取殺蟲(chóng)蛋白：取bt?hd73桿菌菌株，經(jīng)過(guò)菌種活化，培養(yǎng)，洗滌，裂解細(xì)胞得上清液，加入乙酸提取蛋白，將所得固體物質(zhì)洗滌后得到殺蟲(chóng)蛋白；s3、負(fù)載：將重量比為(8-12):(5-10):500:(50-55)的殺蟲(chóng)蛋白、bt?4d19多糖、2-甲基咪唑和醋酸鋅分散于水中，攪拌反應(yīng)，過(guò)濾得到沉淀，洗滌，干燥，得到多糖-蛋白-金屬?gòu)?fù)合有機(jī)骨架；s4、農(nóng)藥配置：將重量比為(20-25):(2.5-3):(0.2-0.4):100的多糖-蛋白-金屬?gòu)?fù)合有機(jī)骨架、分散劑、油性傳遞劑以及水共混，得到微生物農(nóng)藥。

3、通過(guò)采用上述技術(shù)方案，本技術(shù)在bt?4d19桿菌菌株以及bt?hd73桿菌菌株中分別提取了多糖和殺蟲(chóng)蛋白，并全部負(fù)載于金屬有機(jī)骨架中，bt?4d19多糖能夠顯著提升殺蟲(chóng)蛋白的殺蟲(chóng)藥效，二者也能夠均勻分布于金屬有機(jī)骨架中并提升整體微生物農(nóng)藥的熱穩(wěn)定性和光穩(wěn)定性，由此提升了微生物農(nóng)藥的持效期。并且本技術(shù)還加入了分散劑，能夠顯著提高多糖-蛋白-金屬?gòu)?fù)合有機(jī)骨架的均勻分散性，避免因分散不均導(dǎo)致的部分區(qū)域殺蟲(chóng)效果不佳，還加入了油性傳遞劑，可以有效減少微生物農(nóng)藥使用中的霧滴漂移現(xiàn)象，促進(jìn)藥液附著，提高殺蟲(chóng)藥效。

4、本技術(shù)嚴(yán)格控制了殺蟲(chóng)蛋白、bt?4d19多糖以及2-甲基咪唑的重量比，同時(shí)提升了殺蟲(chóng)劑藥效和穩(wěn)定性；又嚴(yán)格控制了多糖-蛋白-金屬?gòu)?fù)合有機(jī)骨架、分散劑、油性傳遞劑以及水的重量比，在確保藥效的同時(shí)，盡可能提升了微生物農(nóng)藥在使用中的藥液附著以及內(nèi)部的分散均勻程度。

5、綜上，本技術(shù)的微生物農(nóng)藥兼具高殺蟲(chóng)藥效、強(qiáng)穩(wěn)定性以及良好的藥液附著能力，經(jīng)試驗(yàn)檢測(cè)證明，施藥4天后，其對(duì)于玉米螟和棉鈴蟲(chóng)的防治效果明顯，存活率均不高于10％，經(jīng)過(guò)55℃升溫?zé)崽幚砗笤偈┧?，仍能使玉米螟和棉鈴蟲(chóng)的存活率不高于18％，經(jīng)過(guò)光照處理后再施藥，仍能使玉米螟和棉鈴蟲(chóng)的存活率不高于22％，在無(wú)人機(jī)噴霧施藥測(cè)試中，液滴覆蓋率不低于25％。

6、優(yōu)選的，所述步驟s3中，殺蟲(chóng)蛋白、bt?4d19多糖和2-甲基咪唑的重量比為10:8:500。

7、通過(guò)采用上述技術(shù)方案，本技術(shù)嚴(yán)格控制重量比，能夠進(jìn)一步提升殺蟲(chóng)蛋白與多糖在金屬有機(jī)骨架中的負(fù)載效率及穩(wěn)定性，增強(qiáng)微生物農(nóng)藥的整體殺蟲(chóng)藥效，該配比優(yōu)化了多糖與殺蟲(chóng)蛋白的協(xié)同作用，使得殺蟲(chóng)成分的殺蟲(chóng)效力顯著提高，同時(shí)有效延長(zhǎng)了微生物農(nóng)藥的持效期。

8、優(yōu)選的，所述步驟s3中，2-甲基咪唑和醋酸鋅的重量比為500:53。

9、通過(guò)采用上述技術(shù)方案，本技術(shù)嚴(yán)格控制二者重量比，能夠精確控制金屬有機(jī)骨架的形成條件，從而優(yōu)化多糖-蛋白-金屬?gòu)?fù)合有機(jī)骨架的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。這種配比有助于提升復(fù)合有機(jī)骨架對(duì)殺蟲(chóng)蛋白和bt?4d19多糖的負(fù)載能力，進(jìn)一步增強(qiáng)微生物農(nóng)藥的熱穩(wěn)定性和光穩(wěn)定性，延長(zhǎng)其持效期，確保在實(shí)際應(yīng)用中對(duì)玉米螟和棉鈴蟲(chóng)等害蟲(chóng)的防治效果不受環(huán)境因素影響。

10、優(yōu)選的，所述步驟s4中，分散劑包括喹啉銅和木質(zhì)素磺酸鈉。

11、通過(guò)采用上述技術(shù)方案，本技術(shù)能夠顯著提高多糖-蛋白-金屬?gòu)?fù)合有機(jī)骨架在水中的均勻分散性，避免因分散不均導(dǎo)致的部分區(qū)域殺蟲(chóng)效果不佳，從而提升微生物農(nóng)藥的整體防治效果。

12、優(yōu)選的，所述喹啉銅和木質(zhì)素磺酸鈉的重量比為(2-3):1。

13、通過(guò)采用上述技術(shù)方案，本技術(shù)這一配比優(yōu)化了分散劑的性能，顯著提高了多糖-蛋白-金屬?gòu)?fù)合有機(jī)骨架在水中的均勻分散性，避免了因分散不均導(dǎo)致的部分區(qū)域殺蟲(chóng)效果不佳的問(wèn)題。由此，該配比下的分散劑增強(qiáng)了微生物農(nóng)藥的整體穩(wěn)定性，確保了藥效在使用過(guò)程中的均勻分布和持續(xù)釋放。

14、優(yōu)選的，所述步驟s4中，油性傳遞劑包括亞麻籽油甲酯、大豆油、大豆油甲酯、米糠油甲酯、椰子油甲酯和大豆油脂肪酸中的一種或多種。

15、優(yōu)選的，所述油性傳遞劑包括椰子油甲酯和大豆油。

16、優(yōu)選的，所述椰子油甲酯和大豆油的重量比為10:(2-3)。

17、通過(guò)采用上述技術(shù)方案，本技術(shù)的椰子油甲酯和大豆油按照特定重量比復(fù)配，能夠顯著提高微生物農(nóng)藥的藥液附著能力，有效減少霧滴飄移現(xiàn)象，從而提升殺蟲(chóng)藥效。具體而言，該重量比優(yōu)化了兩種油性傳遞劑之間的協(xié)同作用，使得農(nóng)藥在施用過(guò)程中更加均勻地覆蓋于作物表面，增強(qiáng)對(duì)害蟲(chóng)的防治效果。

18、優(yōu)選的，所述步驟s4中，多糖-蛋白-金屬?gòu)?fù)合有機(jī)骨架、分散劑、油性傳遞劑以及水的重量比為22.5:2.7:0.3:100。

19、通過(guò)采用上述技術(shù)方案，本技術(shù)嚴(yán)格控制重量比，使得微生物農(nóng)藥在確保高殺蟲(chóng)藥效的同時(shí)，進(jìn)一步優(yōu)化了藥液的分散均勻性和附著能力，多糖-蛋白-金屬?gòu)?fù)合有機(jī)骨架提供核心殺蟲(chóng)成分并提升熱穩(wěn)定性和光穩(wěn)定性；分散劑喹啉銅和木質(zhì)素磺酸鈉的合理配比確保活性成分均勻分布，避免局部藥效不足；油性傳遞劑椰子油甲酯和大豆油按比例配合，有效減少霧滴漂移，促進(jìn)藥液在作物表面的附著，從而提高整體殺蟲(chóng)效果。

20、第二方面，本技術(shù)提供了由上述防治農(nóng)作物害蟲(chóng)的微生物農(nóng)藥的制備方法制得的微生物農(nóng)藥。

21、綜上所述，本技術(shù)具有以下有益技術(shù)效果：

22、本技術(shù)的微生物農(nóng)藥能夠顯著提升殺蟲(chóng)效果，對(duì)玉米螟和棉鈴蟲(chóng)等農(nóng)作物害蟲(chóng)的防治效果明顯，施藥4天后存活率均不高于10％。經(jīng)過(guò)55℃升溫?zé)崽幚砗笤偈┧?，仍能使玉米螟和棉鈴蟲(chóng)的存活率不高于18％，表明其具有優(yōu)異的熱穩(wěn)定性。經(jīng)過(guò)光照處理后再施藥，仍能使玉米螟和棉鈴蟲(chóng)的存活率不高于22％，體現(xiàn)了良好的光穩(wěn)定性。此外，由于加入了分散劑，能夠顯著提高多糖-蛋白-金屬?gòu)?fù)合有機(jī)骨架的均勻分散性，避免因分散不均導(dǎo)致的部分區(qū)域殺蟲(chóng)效果不佳。油性傳遞劑的加入可以有效減少霧滴漂移現(xiàn)象，促進(jìn)藥液附著，提高殺蟲(chóng)藥效，在無(wú)人機(jī)噴霧施藥測(cè)試中，液滴覆蓋率不低于25％。這些效果共同確保了微生物農(nóng)藥兼具高殺蟲(chóng)藥效、強(qiáng)穩(wěn)定性和良好的藥液附著能力。